2008年江苏高考生物第32题释疑

（08江苏生物32题）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题。
（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是 。
（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。
（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？ 。
（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为 。
（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。
①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。
②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

[答案]（1）耐高温 （2）引物对B （3）否 （4）农杆菌 （5）①2 ②1

[疑难1]第（2）小题答案，引物对为何是B？
[解析]由于DNA分子中，G与C之间形成3个氢键，A与T之间只形成2个氢键，所以含G、C较多的DNA分子热稳定性较高。因为题目有“可采用较高的退火温度”的要求，符合条件的引物对中必须G、C含量较多，所以答案是B不是A。

[疑难2]第（5）小题答案如何得出？
[解析]根据图1和表2，我们可以看出，重组质粒T从原来的载体质粒上得到了一个PstⅠ识别位点；载体质粒和抗原基因片段被EcoRⅠ切割后形成了相同的黏性末端，两者重组时黏性末端互补配对形成了一个新的EcoRⅠ位点；载体质粒被SmaⅠ切割后，SmaⅠ的识别位点已不复存在。这样就可以判断出重组质粒T上有一个EcoRⅠ识别位点和一个PstⅠ识别位点，但是没有SmaⅠ的识别位点。所以，在所用的酶均可将识别位点完全切开的条件下，采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切重组质粒T，可以得到2种DNA片断；采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒T，只能得到1种DNA片断。